本试剂盒仅限于科学研究用途,不得用于医学诊断。该试剂盒基于双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)设计。首先,将经过包被的adropin(AD)抗体微孔加入待测样本、标准品以及HRP标记的检测抗体,随后进行温育和彻底洗涤。使用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化为蓝色,随后在酸的作用下变为最终的黄色。显色的深浅与样本中的adropin(AD)浓度成正相关。最终,使用酶标仪在450nm波长下测定光密度(OD值),并计算样品浓度。
尊龙凯时人生就博的试剂盒组成包括:
- 96孔配置:微孔酶标板(12孔×8条),标准品(03mL*6管),样本稀释液(6mL),检测抗体-HRP(10mL),洗涤缓冲液(25mL),底物A(6mL),底物B(6mL),终止液(6mL),封板膜(2张),说明书(1份),自封袋(1个)
- 48孔配置:微孔酶标板(12孔×4条),标准品(03mL*6管),样本稀释液(3mL),检测抗体-HRP(5mL),洗涤缓冲液(15mL),底物A(3mL),底物B(3mL),终止液(3mL),封板膜(2张),说明书(1份),自封袋(1个)
注:标准品(S0-S5)浓度依次为:0、25、50、100、200、400pg/mL。请在2-8℃下保存此试剂盒,有效期为6个月。
样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液并在3000转下离心10分钟,将血清与红细胞迅速分离。
2. 血浆:采用EDTA、柠檬酸盐或肝素作为抗凝剂,3000转离心30分钟,取上清液。
3. 细胞上清液:3000转离心10分钟以去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织与适量生理盐水混合并捣碎,随后在3000转下离心10分钟取上清。
5. 保存:如果样本未及时检测,应按一次用量分装,并在-20℃下冷冻,避免反复冻融,在室温下解冻时确保样品完全均匀化。
自备物品
- 酶标仪(450nm)
- 高精度加样器及枪头(05-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL)
操作步骤和注意事项
1. 自冷藏环境取出试剂盒后,应在室温下平衡15-30分钟后再使用;如未用完,板条需放入密封袋存放。
2. 洗涤液可能出现结晶析出,稀释时可加热水以助溶解,洗涤不会影响结果。
3. 各步骤需使用加样器,并定期校对准确性,避免试验误差;一次加样最好控制在5分钟内,标本数量多时可推荐使用排枪加样。
4. 每次测定时应同步制作标准曲线,建议设定复孔;如样本OD值高于标准品的第一孔,请用样品稀释液按一定倍数稀释后再测定,计算时按照总稀释倍数(×n×5)。
5. 封板膜仅限一次性使用,以防止交叉污染。
6. 严格遵循说明书进行操作,实验结果以酶标仪读数为准。
7. 底物应避光保存。
8. 所有样品、洗涤液及各项废弃物需按照传染性废物处理。
9. 不同批号的试剂成分不得混用。
温馨提示:尊龙凯时人生就博提供代测服务,凡购买我司ELISA试剂盒均可享受免费的ELISA代测服务,详情请咨询销售经理或在线客服。