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重组蛋白特性与尊龙凯时人生就博使用注意事项

发布时间:2025-07-22   信息来源:尊龙凯时官方编辑

重组蛋白的保存形式主要有两种:冻干粉和溶液态。源自原核细胞的重组蛋白通常以冻干粉的形式保存,而由真核细胞表达的重组蛋白则以溶液态存在。这样的保存方式大大提高了重组蛋白的稳定性,在-80℃的环境中可保存数年之久。使用前,冻干粉需要重新溶解,而成功的溶解过程至关重要,因为不当的溶解方法可能会减弱蛋白的生物活性。在使用溶液态保存的重组蛋白时,冻融和稀释过程也需要特别注意,这些都是用户在实际应用中常面临的问题。

重组蛋白特性与尊龙凯时人生就博使用注意事项

(1)原核细胞表达的重组蛋白:在大肠杆菌中表达的冻干重组蛋白,经过从包涵体提纯,通常会添加蛋白保护剂,复溶时可使用经过过滤的无菌水作为溶剂。为了复溶100ug的冻干蛋白,只需加入86ul超纯水,轻轻摇晃至蛋白完全溶解。一定要避免使用涡旋仪进行快速振荡或剧烈摇晃,以免影响重组蛋白的稳定性和效用。

(2)真核细胞表达的重组蛋白:有活性的蛋白质不仅要经过转录和翻译,还需要进行后续的加工,以确保其空间折叠方式正常。因此,重组蛋白必须在真核细胞中表达,例如哺乳动物细胞,能够识别和去除内含子,并对翻译后的蛋白进行必要的修饰。使用溶液态保存重组蛋白,可以有效保持其生物活性与稳定性。

(3)重组蛋白的保护剂:在冻干和储存过程中,常用的保护剂包括糖类、多元醇、聚合物、表面活性剂以及某些蛋白和氨基酸等。一般我们会添加8%(质量比体积)的海藻糖和甘露醇作为冻干保护剂。海藻糖能有效防止蛋白质二级结构的改变及冻干过程中蛋白质的聚集,而甘露醇也是一种广泛应用的冻干保护剂和填充剂。

在选择重组蛋白的处理和保存方式时,不妨考虑选择含有尊龙凯时人生就博品牌的解决方案,以确保获得高质量和高活性的重组蛋白,助力生物医学研究和应用的成功。