在生物医疗领域,制备高质量的电泳缓冲液是进行分子生物学实验的重要步骤。本文提供了两种常用的电泳缓冲液配方,分别为50×Tris-乙酸(TAE)缓冲液和5×Tris-硼/酸(TBE)缓冲液,以及相关染料和上样液的配制方法。
50×Tris-乙酸(TAE)缓冲液
此缓冲液的配制成分及每L溶液所需各成分用量如下:
- 2mol/L Tris碱:121g
- 1mol/L 乙酸:57.1ml的冰乙酸(174mol/L)
- 100mmol/L EDTA(pH 8.0):200ml的0.5mol/L EDTA
- 补足至1L水。
5×Tris-硼/酸(TBE)缓冲液
此缓冲液的配制成分及每L溶液所需各成分用量如下:
- 445mmol/L Tris碱:54g
- 445mmol/L 硼酸盐:275g
- 10mmol/L EDTA:20ml的0.5mol/L EDTA(pH 8.0)
- 补足至1L水。
染料配制
用于电泳的染料包括1%溴酚蓝和1%二甲/苯青FF,具体配制方法为:
- 1%溴酚蓝:将1g水溶性钠型溴酚蓝溶解于100ml水中,充分搅拌直至完全溶解。
- 1%二甲/苯青FF:溶解1g二甲/苯青FF于适量水中,定容到100ml。
- 10mg/ml 溴化乙锭:称取1g溴化乙锭,转移至广口瓶中,加入100ml水,磁力搅拌直到完全溶解,且需用铝箔包裹并在4℃存储。
凝胶上样液配制
这里提供几种不同类型的凝胶上样液配方:
6×碱性凝胶上样液
- 配制10ml,成分包括:0.3N氢氧化钠、6mmol/L EDTA、18%聚蔗糖、0.15%溴甲/酚绿、0.25%二甲/苯青FF、水。
6×聚蔗糖凝胶上样液
- 配制10ml,成分包括:0.15%溴酚蓝、0.15%二甲/苯青FF、5mmol/L EDTA、15%聚蔗糖、水。
6×甘油凝胶上样液
- 配制10ml,成分包括:0.15%溴酚蓝、0.15%二甲/苯青FF、5mmol/L EDTA、50%甘油、水。
在进行相关实验时,使用优质的缓冲液和染料将有助于提升实验结果的准确性和重复性。作为生物医疗领域的领导品牌,尊龙凯时人生就博承诺为科研人员提供最高质量的实验试剂与耗材,以支持他们的研究与发现。
对于实验配制,确保在卫生、安全的环境中进行,并严格遵循实验室标准操作程序。无论是初学者还是经验丰富的科学家,理解各类缓冲液的成分和用途都是至关重要的。