本试剂盒仅用于科学研究,严禁用于医学诊断。本文将介绍小鼠多瘤病毒 (PY) Elisa 试剂盒的使用说明。
检测原理
本试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。将样品、标准品及 HRP 标记的检测抗体依次添加至预先包被 adropin(AD)抗体的微孔中,经过温育及充分洗涤后,使用底物 TMB 显色。在过氧化物酶的催化下,TMB 转化为蓝色,随后在酸性环境中进一步转化为最终的黄色。颜色深浅与样品中 adropin(AD)的浓度呈正相关。最后,利用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度(OD 值)以计算样品浓度。
样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用无热原和内毒素的试管,操作时避免细胞刺激。收集血液后,进行 3000 转离心 10 分钟,快速小心地分离血清和红细胞。
2. 血浆:使用 EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝,再进行 3000 转离心 30 分钟,取上清。
3. 细胞上清液:进行 3000 转离心 10 分钟以去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织与适量生理盐水混合并捣碎,接着进行 3000 转离心 10 分钟,取上清。
5. 保存:若样本未能及时检测,请按单次用量分装,冷冻保存于 -20℃,避免反复冻融。解冻时在室温下确保样品充分均匀解冻。
操作注意事项
有关试剂盒的组成说明,标准品(S0-S5)的浓度依次为:0、25、50、100、200、400 pg/mL。
试剂的准备
稀释 20×洗涤缓冲液:将蒸馏水按 1:20 稀释,即 1 份 20×洗涤缓冲液加 19 份蒸馏水。
洗板方法
操作步骤与结果判断需根据实验要求进行,建议在 Excel 工作表中以标准品浓度为横坐标,对应的 OD 值为纵坐标绘制标准曲线,通过曲线方程计算各样本的浓度值。
对于使用本试剂盒的免责声明,强调实验操作需谨慎,确保样本处理过程符合生物安全规定。选择尊龙凯时人生就博品牌,以确保您在生物医疗领域的研究成果可靠且准确。