尊龙凯时人生就博旗下的2DLuminescentCellViabilityAssay是基于ATP依赖的荧光素酶催化反应,通过化学发光信号来测定细胞内ATP含量,从而评估细胞活力或定量活细胞数量。该检测方法具备宽广的线性范围、高灵敏度及良好稳定性。在96孔板中,实验显示在100个至100,000个细胞范围内呈现出良好的线性关系,尽管不同细胞的检测上限存在差异。此外,此试剂盒的操作简单,所提供的检测试剂为即用型,具备稳定的读数和快速的检测速度,整个过程仅需约10分钟,无需对细胞进行清洗或更换培养液。与其他细胞活力评估方法(如Calcein-AT和CCK-8)相比,2DLuminescentCellViabilityAssay显得更加简便快捷。
本产品的优势包括:1. 方便快速:即用型检测试剂,读数稳定,约10分钟完成检测;2. 灵敏度高:能够检测最低10nmol的ATP;3. 线性范围宽:在100至100,000个细胞范围内具良好的线性关系;4. 高通量:适合少量样品及大量样品的高通量筛选。
使用该试剂盒时需遵循以下步骤: 一、试剂准备 取出试剂并置于4℃融化过夜,或在实验当天室温融化。同时确保其平衡至室温后方可使用。将体积适量的试剂与TritonX-100混合,终浓度为0.2%。
二、检测步骤 1. 细胞培养:使用适合化学发光检测的96孔板,在每孔接种100μL细胞,并设置不含细胞的阴性对照。 2. 制作ATP标准曲线:稀释ATP标准溶液至适当浓度,逐孔加入100μL标准品。 3. 检测细胞活力: (1)融解检测试剂并平衡至室温; (2)细胞培养板室温平衡10分钟; (3)每孔加入100μL检测试剂; (4)以室温振荡2分钟以促进细胞裂解; (5)静置10分钟使发光信号稳定; (6)使用多功能酶标仪进行检测; (7)根据化学发光读数及ATP标准曲线计算细胞相对活力。
三、注意事项 1. 温度控制:荧光素酶对温度敏感,建议分装后置于-20℃避光保存; 2. 化学因素:培养基和血清可能影响发光强度,必须设定对照孔以排除干扰; 3. 光敏感:确保试剂储存时避光以减少发光强度衰减; 4. 操作防污染:戴口罩和手套,避免交叉污染。
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